酶標儀可以檢測一些實質性的感染和病變,避免因輸血引起感染引發的醫療事故糾紛的必要手段,光電檢測器將這一待測標本不同而強弱不同的光信號轉換成相應的電信號。
酶標儀單色光一部分被標本吸收,另一部分標本照射到光電檢測器上,電信號經前置放大,對數放大,模數轉換等信號處理后送入微處理器進行數據處理和計算,*后由顯示器和打印機顯示結果。微處理機還通過控制機械驅動機構X方向和Y方向的運動來移動微孔板,實現自動進樣檢測過程,另一些酶標儀是采用手工移動微孔板進行檢測,使酶標儀更小巧,結構也更簡單。
酶標儀光是電磁波,波長100nm——400nm稱為紫外光,400nm——780nm之間的光可被人眼觀察到,大于780nm稱為紅外光。綠色植物之所以是綠色,是因為植物吸收的大部分為紅橙光和藍紫光,但對綠色不吸收,反射出來,呈現為綠色。酶標儀測定的原理是在特定波長下,檢測被測物的吸光值。微孔板是一種經事先包理于放置待測樣本的透明塑料板,板上有多排大小均勻一致的小孔,孔內都包埋著相應的抗原或抗體,微孔板上每個小孔可盛放零點幾毫升的溶液。在使用酶標儀的時候,我們應該注意這些方面:
(一)外觀
酶標儀上應有儀器名稱,型號,編號,生產廠家,出廠日期和電源電壓;各調節旋鈕,按鍵和開關均能正常工作,外表面無明顯機械損傷;顯示文字應清楚完整。
(二)酶標儀的穩定性(漂移)
選用492nm波長,在吸光度o.0A處,測量標稱值為1.0A的光譜中性濾光片(測量操作按儀器說明進行),記錄儀器示值或均值,10min后再次記錄儀器示值或均值,前后兩次測量值之差不應超過±0.00。
(三)吸光度測量的準確度
選用405,492和620nm波長,以空氣為參比,分別測量標稱值為0.5和1.0A的光譜中性玻璃濾光片,用測試板代替酶標板,按儀器說明連續測量3次,按下式計算準確度:AA=1/3(A、+A。+A3)—A:(A:為標準值)。
(四)吸光度測量的重復性
波長選用同(3),在酶標板排加注空白溶液,第二排加入濃度為200rig/ml的重鉻酸鉀溶液,重復測量5次。記錄每次測量的第二排吸光度值,取第二排任一孔吸光度值與各次對應孔吸光度值。
(五)酶標儀的線性
選用540nm波長,將標稱值o.5,1.0A中性濾光片分別放入測試板樣本位置中,以空氣為參比,各重復測量3次;然后將以上兩片中性濾光片疊加后置于測試板的同一孔位中,重復測量3次。
(六)測量速度的檢定
選用492nm波長,放人96孔酶標板進行測量,用秒表計測儀器打印出全部數據的時間。
酶標儀除了在選購時,應盡可能自檢外,在用于中也應定期檢定,以保證酶標儀測量的有效性。